Ιδρυματικό Αποθετήριο Τ.Ε.Ι. Πελοποννήσου
Ποσοτικοποίηση της σήψης λαιμού και ρίζας φυτών τομάτας από Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici με τη χρήση γενετικά τροποποιημένου στελέχους του μύκητα
Αποθετήριο DSpace/Manakin
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.
| dc.contributor.author | Αγγέλου, Ιωάννα | el |
| dc.date.accessioned | 2015-11-24T20:09:46Z | |
| dc.date.available | 2015-11-25T03:00:30Z | |
| dc.date.issued | 2015-11-24 | |
| dc.identifier.uri | http://nestor.teipel.gr/xmlui/handle/123456789/13850 | |
| dc.title | Ποσοτικοποίηση της σήψης λαιμού και ρίζας φυτών τομάτας από Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici με τη χρήση γενετικά τροποποιημένου στελέχους του μύκητα | el |
| heal.type | Προπτυχιακή/Διπλωματική εργασία | el |
| heal.secondaryTitle | el | |
| heal.keyword | Φυτοπαθολογία | el |
| heal.keyword | Φυτά | el |
| heal.keyword | Ασθένειες | el |
| heal.keyword | Μύκητες | el |
| heal.keyword | Πείραμα | el |
| heal.contributorName | el | |
| heal.language | gre | el |
| heal.access | free | el |
| heal.accessText | el | |
| heal.license | Αναφορά Δημιουργού-Μη Εμπορική Χρήση-Όχι Παράγωγα Έργα 3.0 Ελλάδα | el |
| heal.fileFormat | * | |
| heal.recordProvider | ΤΕΙ Πελοποννησου | el |
| heal.publicationDate | 2000-01-01 | el |
| heal.abstract | Η σήψη λαιμού και ρίζας, που προκαλείται από το μύκητα Fusarium oxysporum f.sp. radicis-lycopersici Jarvis & Shoemaker, είναι μία σοβαρή ασθένεια που συναντάται κυρίως σε θερμοκηπιακές καλλιέργειες τομάτας. Ένα άγριο στέλεχος του μύκητα μεταμορφώθηκε επιτυχώς με τα γονίδια ?-D- γλουκουρονιδάση (GUS,i//cM) του Ε. coli ως το γονίδιο έκφρασης, και το γονίδιο της φωσφοτρανσφεράσης της υγρομυκίνης (hph) ως το γονίδιο επιλογής. Η εισαγωγή των γονιδίων επιτεύχθηκε με τους πλασμιδιακούς φορείς ρΝΟΜ 102 102 και ρΑΝ 7- 1, αντίστοιχα. Επτά (7) τροποποιημένα στελέχη απομονώθηκαν έπειτα από δοκιμές που έγιναν για την επαλήθευση εισαγωγής και ενσωμάτωσης των δύο γονιδίων με αναλύσεις PCR και Southern. Αυτά τα στελέχη ελέγχθηκαν για μιτωτική σταθερότητα με απομονώσεις μοναδικών αποικιών, και ακολούθησε δημιουργία καμπύλης ανάπτυξης (σε δύο διαφορετικά θρεπτικά υποστρώματα), καθώς και έλαβαν μέρος και άλλες μετρήσεις που αφορούσαν στη φυσιολογία αυτών των στελεχών (ζύγιση μυκηλιακού βάρους, μέτρηση συγκέντρωσης παραγομένων κονιδίων). Τα στελέχη δεν έδειξαν σημαντικές διαφορές από το άγριο στέλεχος. Η δραστικότητα του GUS μετρήθηκε για τα μεταμορφωμένα στελέχη με τη χρήση ρ-νιτροφαινόλης γλουκουρονιδίου σαν υπόστρωμα και ακολούθησαν μετρήσεις σε φασματοφωτόμετρο στα 415 nm. Το στέλεχος f30 έδειξε πως υπάρχει θετική συσχέτιση ανάμεσα στη δραστικότητα του GUS και στο νωπό μυκηλιακού βάρους του στελέχους. Η ανίχνευση της μυκηλιακής βιομάζας σε φυτά επιτεύχθηκε με την παρακολούθηση της δραστικότητας του GUS μάκρο- και μικροσκοπικά και η ποσοτικοποίηση της ασθένειας ήταν εφικτή με τη μέτρηση της δραστικότητας της β- γλουκουρονιδάσης σε εκχυλίσματα μολυσμένων φυτικών ιστών. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η ποσοτικοποίηση της μυκηλιακής βιομάζας είναι εφικτή κυρίως κατά τα πρώιμα στάδια της ασθένειας. | el |
| heal.abstract | Fusarium crown and root rot, caused by Fusarium oxysporum f.sp. radicis- lycopersici Jarvis & Shoemaker, is a serious disease of greenhouse tomatoes. A wild type isolate was successfuly cotransformed with the E. coli (3-D- glucuronidase (GUS ,uidA) as the reporter gene, and the hygromycine phosphotransferase (hph) gene as the selective marker. The insertion was accomplished with the plasmid vectors pNOM 102 102 and pAN 7-1 respectevely. Seven (7) transformants were isolated after being tested for the incorporation of the two genes by PCR and Southern blot analysis. These transformants were tested for mitotic stability by single conidia isolation, and growth patterns in two different substrates were obtained. Other physiology tests took place such as mycelial weighing and conidia concetration. The isolates were found to be similar to the wild- type strain. GUS activity was quantified for the transformants using p-nitrophenol glucuronide as a substrate and spectrophotometer assays followed at 415 nm. The f30 transformant gave positive correlation between GUS activity levels and the fresh weight of the mycelium. Detection of fungal biomass in planta was achieved by following the expression of GUS both macro- and microscopically and quantification of the disease was feasible by measurements of p-glucuronidase activity in infected plant extracts. The results show that quantification of the fungal biomass is possible especially during the early infection stages. | en |
| heal.advisorName | Μαρκόπουλος, Κυριάκος | el |
| heal.advisorName | Παπαδοπούλου, Καλλιόπη | el |
| heal.committeeMemberName | el | |
| heal.academicPublisher | ΤΕΙ Πελοποννήσου | el |
| heal.numberOfPages | 77 | * |
